這種情況可能的原因包括：

1．由於更換了不同培養液或血清，細胞需要重新適應。

2．試劑儲存不當，培養液中一些細胞生長必需成分如谷氨醯胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞。

3．培養物中有少量細菌或真菌汙染。

4．接種細胞起始濃度太低。

5．細胞已老化。

6．支原體汙染。

7

．

檢查細胞傳代是否頻繁；

8

．

胰蛋白酶稀釋是否有誤；

9

．

檢查共用的裝置和試劑、溫室和孵箱溫度。

建議解決方法：

1．比較新培養液與原培養液成分，比較新血清與舊血清支援細胞生長實驗。讓細胞逐漸適應新培養液。

2．換入新鮮配製培養液，或補加谷氨醯胺及生長因子。

3．用無抗生素培養液培養，如發現汙染，更換培養物。

4．

血清需要儲存在5℃到20℃，

培養液需在2-8℃避光儲存。含血清完全培養液在2-8℃儲存，並在2周內用完。

5．增加接種細胞起始濃度。

6．換用新的保種細胞。

7．

要輕輕吹打消化細胞；

8．隔離培養物，檢測支原體。清潔支架和培養箱。如發現支原體汙染，更換新的培養物。

培養細胞死亡的原因：

常見的可能原因是細胞傳代時，消化過度，細胞嚴重受傷。如經驗不足，細胞傳代消化時，在顯微鏡下觀察，至細胞變圓、脫壁，加入含血清的培養液，終止消化。其他原因包括長途運輸，細胞在不適宜的溫度下時間過長；培養液中營養成分消耗殆盡，沒有及時換液。如果原來細胞狀態較好，換液後細胞死亡，應考慮是培養液及血清的質量。-好事先已證明培養液及血清質量良好。

作者：畢合生物

公眾號：畢合生物

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