明朝天啟年間，陝北地區災荒連年，官府糧差分文不減。李家生活非常困難。李自成小時候曾被舍入寺廟當小和尚，名黃來僧，並給本邑姬姓地主牧羊度日。十幾歲喪母，不久父親又去世。二十一歲那年，無依無靠的他應募到銀川驛站當一名驛卒。不久，因無力償還豪紳文舉人的債，他曾被戴上枷鎖嚴刑拷打，後來在窮夥伴的幫助下，殺死文舉人，又與侄兒李過逃往甘肅當邊兵。當時，邊兵的生活也很困苦，糧餉不足，軍官又貪汙、剋扣軍餉，兵士經常挨餓受凍。

明朝末年的驛站制度有很多弊端，明思宗朱由檢在崇禎元年（1628年）驛站進行了改革，精簡驛站。李自成因丟失公文被裁撤，失業回家，並欠了債。同年冬季，李自成因繳不起舉人艾詔的欠債，被艾舉人告到米脂縣衙。縣令晏子賓將他“械而遊於市，將置至死”，後由親友救出後，年底，殺死債主艾詔，接著，因妻子韓金兒和村上名叫蓋虎的通姦，李自成又殺了妻子。兩條人命在身，官府不能不問，吃官司不能不死，於是，就同侄兒李過於崇禎二年（1629年）二月到甘肅甘州（今張掖市甘州區）投軍。

當時，楊肇基任甘州總兵，王國任參將。李自成不久便被王國提升為軍中的把總。崇禎二年（1629年）冬，後金兵大舉南下，京師吃緊。為了保住北京，朝廷急調四方軍隊赴北京防守。甘肅邊兵李自成所在部隊隨參將王國向京師進發，途經金縣（今甘肅榆中），兵士們要求發餉，參將王國卻剋扣不發。於是，在榆中（今甘肅蘭州榆中縣）參將王國和當地縣令被殺，兵民發動了兵變。

崇禎十二年（1639年），張獻忠在谷城（位於湖北襄樊）再次反叛明廷，李自成從商洛山中率數千人馬殺出。崇禎十三年（1640年），李自成趁明軍主力在四川追剿張獻忠之際入河南，收留饑民，開倉而賑饑民。“遠近饑民荷鋤而往，應之者如流水，日夜不絕，一呼百萬，而其勢燎原不可撲”。自此，李自成軍隊發展到數萬，提出“均田免賦”口號，即民歌之“迎闖王，不納糧”。

李自成攻克洛陽，殺萬曆皇帝的兒子福王朱常洵，從後園弄出幾頭鹿，與福王的肉一起共煮，名為“福祿宴”，與將士們共享。同時，李自成沒收福王府中金銀財貨和大批糧食、物資，釋出告示大賑饑民。之後，在一年半之內，三圍省城開封未果，最後一次崇禎十五年（1642年）黃河決堤沖毀開封。先後殺死陝西總督傅宗龍、汪喬年。十月，在河南郟縣敗明陝西巡撫孫傳庭。

崇禎十六年（1643年）正月，李自成攻下承天，被舉為“奉天倡義文武大元帥”。三月，李自成改襄陽為襄京，稱“新順王”，招撫流亡的貧苦農民，“給牛種，賑貧困，畜孽生，務農桑”，又“募民墾田，收其籽粒以餉軍”。同月，殺與之合軍的農民領袖羅汝才和革左五營的賀一龍。四月，殺叛將袁時中。五月，張獻忠克武昌建立“大西”政權。八月，督師孫傳庭擁兵10萬出關。李自成聞訊，即率主力北上，九月，兩軍對壘於郟［jiá］縣（今河南省三門峽市西北）。時值大雨滂沱，明軍糧運不繼。李自成一面動員百姓堅壁清野，使明軍無法就地籌糧；一面派大將劉宗敏率萬餘輕騎出汝州，截斷明軍糧道。孫傳庭聞訊大驚，不得已回師欲打通糧道。李自成率師追擊400裡，大敗明軍， 斬首四萬餘級。李自成乘勝揮師西進。十月，李自成攻破潼關，殺死孫傳庭，佔領陝西全省

崇禎十七年（1644年）三月十五日（4月21日），農民軍抵達居庸關，監軍太監杜之秩、總兵唐通不戰而降，

1644年全國形勢同時，劉芳亮率領南路軍，東出固關後，真定太守邱茂華、遊擊謝素福出降，大學士李建泰在保定投降。三月十六日，李自成部過昌平，抵沙河。十七日進高碑店、西直門，以大炮轟城，入午攻打平則門、彰義門、西直門。三月十七日半夜，守城太監曹化淳率先開啟外城西側的廣寧門，農民軍由此進入今復興門南郊一帶。三月十八日，李自成派在昌平投降的太監杜勳入城與崇禎帝秘密談判。據《小腆紀年附考》卷四載，李自成提出的條件為：“闖人馬強眾，議割西北一帶分國王並犒賞軍百萬，退守河南······闖既受封，願為朝廷內遏群寇，尤能以勁兵助剿遼藩。但不奉詔與覲耳。”雙方談判破裂。三月十九日清晨，兵部尚書張縉彥主動開啟正陽門，迎劉宗敏所部軍，中午，李自成由太監王德化引導，從德勝門入，經承天門步入內殿。此時崇楨帶著太監王承恩上煤山瞭望，又返回乾清宮，大臣皆己逃散，最後崇禎前往景山自縊，史稱甲申之變。李自成下令將崇禎“禮葬”，在東華門外設廠公祭，後移入佛寺。二十七日，葬于田貴妃墓中。